İçerik
- aşamaları
- Yöntem 1 Bakterileri doğrudan gözlemleyin
- Yöntem 2 Biyokütlenin ölçülmesi
- Yöntem 3 Türbidimetri ile devam edin
Bakteriyel büyümeyi ölçmenin birkaç yolu vardır ve bazılarının uygulanması diğerlerinden daha zordur. En basit olanı yaygın kullanılır ve ölçümler sırasında katı olmaları şartıyla nispeten kesin sonuçlar verir. En yaygın teknikler, bakteri gözlemleme ve sayma, biyokütle ve kuru biyokütle ve türbidimetri ölçümüdür. Okul laboratuvarınız bu yöntemlerden en az biri için gerekli donanıma sahip olmalıdır.
aşamaları
Yöntem 1 Bakterileri doğrudan gözlemleyin
-
Ekipmanı hazırla. Tüm biyoloji laboratuvarlarında genellikle bulunanlara ek olarak, bazı özel öğelere ihtiyacınız olacaktır. Tüm aletlerin ve kapların parmaklarınızın ucunda kullanışlı olduğundan emin olun, bu nedenle ekipmanın bulunduğu dolapta ileri ve geri gitmeniz gerekmez. Her aşamada ne kullanacağınızı bilmek için ne yapacağınızı önceden düşünün. Ayrıca bazı temel terimleri bilmek zorunda kalacaksınız.- Bir hemasitometre edinin. Mikroskopla ilişkili numaralandırma bölmelerine sahip bir bıçaktır. Ayarlaması ve kullanımı çok kolay bir cihazdır. Bazı okullar ve araştırma laboratuarları için ekipman konusunda uzmanlaşmış tedarikçilerinden bulabilirsiniz. Bir kullanım kılavuzu genellikle verilmektedir.
- Bir petri tabağı alın. Bakterileri gözlemleyebileceğiniz küçük, yuvarlak, sığ bir kaptır.
- "Kültür" terimi, bilimsel bir deneyin parçası olarak yapay olarak çoğaltılan bir mikroorganizma anlamına gelir.
- "Kültür suyu", kültürün gelişeceği ortamdır.
-
Petri kabını kullanın. Bakterileri kutuya koyun ve mikroskop altında gözlemleyin. Doğrudan bir slayta da yerleştirebilirsiniz. Sonra mevcut bakteri hücrelerinin sayısını sayın. -
Doğru konsantrasyona sahip olduğunuzdan emin olun. Çok fazla bakteri varsa, üst üste geleceklerdir ve onları doğru şekilde sayamayacaksınız. Bu durumda, kültürü biraz suyu ile karıştırarak seyreltin. Çok az varsa, sonuç önemli olmayacak. Konsantrasyonu arttırmak için suyu filtrelemelisiniz. -
Bakterileri say. Son adım sadece saymaktır. Mikroskop altındaki sayım odalarına bakın ve gördüğünüz hücre sayısını not edin. Sonucu diğer benzer deneyimlerle karşılaştırın.
Yöntem 2 Biyokütlenin ölçülmesi
-
Gerekli enstrümanlara sahip olduğunuzu kontrol edin. Bu yöntemin uygulanması yavaştır ve pahalı ekipmanların kullanılmasını içerir. Yıkama yapmazsanız başka bir teknik kullanın. Diğer yandan, içinde bulunduğunuz laboratuvar doğru araçlara sahipse, biyokütle ve kuru kütlenin ölçümü idealdir çünkü doğru sonuçlar verir. İhtiyacın var:- cebri konveksiyonlu bir hidrolik fırın,
- alüminyum tartı tenceresi,
- birkaç Erlenmeyer şişesi,
- bir santrifüj veya laboratuvar filtrasyon sistemi.
-
Ürünün bir Erlenmeyer şişesinde olup olmadığını kontrol edin. Bu durumda değilse, içine dökün. Deneyin bu aşamasında, bakteriler hala kültür suyu içindedir. Daha sonra ayrılacaklar. -
Tartım kefesini kurutun. Bunun için fırına koyun. Ayrıca, 0,45 porm gözenekli 47 mm çapında bir selüloz asetat membran filtre de kullanabilirsiniz. Hangi araç kullanılırsa kullanılsın, mahsulün üzerine konulduğunda elde ettiğiniz sonuçlardan çıkarılabilmesi için kütlesini doğru bir şekilde ölçün. -
Mix. Kültürleri homojen hale getirecek şekilde karıştırın. Aslında, yerçekimi nedeniyle, hücreler doğal olarak kabın dibine düşme eğilimindedir. Bu nedenle, düzgün bir şekilde dağıtılmış olan ve numunenizin daha temsili olduğu için biraz sallanmanız gerekir. -
Santrifüj. Santrifüj kullanarak, bakterileri kültür suyundan ayırın. Bu cihaz kabı ve karşı ağırlığı çok yüksek bir hızda döndürmek için kullanılır. Suyu akar, bu sadece canlıları tutar. Daha fazla bilgi için, internette bir santrifüjün nasıl kullanılacağı hakkında bilgi bulacaksınız. -
Hamuru al. Tartım tenceresine bırakın. Kültür suyunu atabilirsin, artık ihtiyacın olmayacak, ama el altında tut. -
Santrifüjü durulayın. Durulama suyunu bakteri hücrelerine ek olarak tartı kabının üzerine dökün. Her şey için elde edilen sonuç size biyokütle kazandırır. -
Kuru kütleyi bulun. Numunenizin kuru biyokütlesini bilmek için, cihazınızla birlikte verilen talimatlara göre tartı tepsisini 6 ila 24 saat boyunca 100 ° C'de ayarlanmış fırına yerleştirin. Bakterilerin yanmasını önlemek için bu sıcaklığı aşmamaya dikkat edin. Sonra her şeyi tartın, ardından tepsinin kütlesini çıkarın.
Yöntem 3 Türbidimetri ile devam edin
-
Ekipmanını hazırla. Birçok bilim laboratuarında bulunan bir cihaz olan bir ışık kaynağına ve bir spektrofotometreye ihtiyacınız olacak. Her modelin kendi çalışması olduğundan, verilen kullanım kılavuzuna bakın. Bu yöntem, sadece ucuz ve kullanımı kolay araçlar gerektirdiğinden, bakteriyel büyümeyi ölçmek için en sık kullanılan yöntemlerden biridir. -
Kültüre ışık verin. Bulanıklık partiküllerdeki bir sıvının içeriğini değerlendirmek için kullanılır, az ya da çok bulutlu olup olmadığını tespit etmek için tutarlar. Bu ölçümden elde edeceğiniz sonuç NTU (veya Nefelometrik Türbidite Üniteleri) cinsinden verilecektir. Numunenin türbiditesini doğru bir şekilde ölçmek için cihazın kalibrasyonunun yapılması gerekli olabilir. -
Not alın. Bulanıklık, numunedeki bakteri miktarıdır. Spektrofotometre, değeri bulanıklık ile ters orantılı olan çözeltinin (% T) geçirgenliğini de bilmenizi sağlar. Daha sonra bakteri üremesini ölçmek için farklı örnekler üzerinde elde edilen sonuçları karşılaştırın.